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使用液氮罐儲存細胞樣品的具體方法是什么?程序降溫的具體步驟

點擊次數(shù):3589 更新時間:2017-08-01

使用液氮罐儲存細胞樣品的具體方法是什么?程序降溫的具體步驟

 

1.預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4冰箱保存預冷;
2.用胰酶對細胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);
3.再次用*培養(yǎng)液懸浮細胞,將預冷的凍存液加入消化*的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻。
4.在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期。
5.凍存步驟的細致直接關(guān)系到細胞復蘇時的活力

細胞凍存有兩種方法:傳統(tǒng)的方法是利用冷存管處于4 -20 -80℃三溫區(qū)保存,程序降溫方法是利用程序降溫盒設(shè)定程序由室溫降低至-80,后再放置到液氮罐中長期保存。

 

 

液氮罐與-86度超低溫冰箱保存細胞的區(qū)別?

 

首先,凍存的細胞,溫度越低,保存的時間越長,像哺乳類細胞凍-80度,存放于-86度超低溫冰箱內(nèi),保存半年沒問題,但是如果要保存時間更長,或者長久保存,就必須要用液氮罐來儲存,-196度超低溫儲存。

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